QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Priskriboj
La 2× QuickEasyTMReala PCR Mix-Taqman provizita de la QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman-ilaro estas nova generacia majstra miksaĵsistemo dizajnita por Real Time PCR-amplifiga reago uzante specifajn fluoreskajn sondilojn.Ĝia kerno Foregene HS Taq DNA Polymerase estas bazita sur Antikorpa modifo, uzata kune kun Foregene plue optimumigita PCR-sistemo, havas pli altan specifecon kaj plifortigan efikecon.Kompare kun ordinara PCR-miksaĵo, ĝi havas pli fortan plifortigan kapablon kaj pli malaltan miskongruan indicon.Ĝi povas esti uzata en fluoreskeca kvanta PCR-reago por redukti nespecifan plifortigon kaj plibonigi la precizecon de PCR.Ĝi povas multe plibonigi produktospecifecon kaj reago-sentemon.En la sama tempo, ROX estis disponigita kiel interna referenca tinkturfarbo.
La QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman-ilaro havas larĝan amplekson de apliko al la kvanto de ŝablono, kaj povas akiri bonan norman kurbon en malsamaj kvantaj regionoj, kaj povas precize kvantigi kaj detekti celajn genojn kun bona ripeteblo kaj alta fido.
Specifoj
200 Preparoj,500 Preparoj,1000 Preparoj,2000 Preparoj
Kit-komponantoj
Rapida FacilaTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsistemo) | ||||
Enhavo de ilaro | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Preparoj | 500 Preparoj | 1000 Preparoj | 2000 Preparoj | |
2×RapideFacilaTM Reala PCR Miksi-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×ROX Referenca Tinkturo | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
DNase-Libera ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
IFU | 1peco | 1peco | 1peco | 1peco |
Trajtoj & avantaĝoj
■ La unika PCR-optimumiga sistemo faras 2×QuickEasyTMReala PCR Mix-Taqman pli kongrua.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase havas pli altan plifortigan efikecon, pli altan plifortan sentemon kaj pli altan plifortigan specifecon.
■ 2× Rapida FacilaTM Reala PCR-Miksaĵo -Taqman uzas unikan sistemon optimumigitan de Foregene por plibonigi la sentemon kaj specifecon de sekvenco-specifa enketo-detekto, kiu povas esti uzata por genotipado kaj kopionumera variado kaj akiri precizajn rezultojn.
■ Ĉi tiu produkto venas kun ROX interna referenca tinkturo, kiu povas esti uzata por forigi signalan fonon kaj signalan eraron inter putoj, kio estas oportuna por klientoj uzi en malsamaj specoj de kvantaj PCR-instrumentoj.
Kit-aplikaĵo
■ Fluoreskeca kvanta PCR por ŝablono kvanta analizo;
■ Conventional PCR plifortigo;
■ Povas esti uzata por alelo-detekto.
Stokado kaj Konsumodaŭro
La ilaro devas esti konservita je -20 °C en la mallumo;se ĝi estas uzata ofte, ĝi ankaŭ povas esti konservita je 4 °C dum mallonga tempo (uzu ene de 10 tagoj).
Real Time PCR-komencaj dezajnaj principoj
Antaŭen Enkonduko kaj Inversa Enkonduko
Por Real Time PCR, primer-dezajno estas tre grava.Enkondukoj estas rilatitaj al la specifeco kaj efikeco de PCR-plifortigo, kaj povas esti dizajnitaj rilate al la sekvaj principoj:
Primer-longo: 18-30bp.
GC enhavo: 40-60%.
Tm-valoro: Primer-dezajnosoftvaro, kiel ekzemple Primer 5, povas doni la Tm-valoron de la enkonduko.La Tm-valoroj de la kontraŭfluaj kaj kontraŭfluaj enkondukoj devus esti kiel eble plej proksimaj.Oni ankaŭ povas uzi la kalkulformularon de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Dum elfarado de PCR, temperaturo sub la enkonduka Tm-valoro de 5 °C estas ĝenerale elektita kiel la kalcia temperaturo (la ekvivalenta pliiĝo en la kalcia temperaturo povas pliigi la specifecon de la PCR-reago).
Enkondukoj kaj PCR-produktoj:
Dezajno primer PCR plifortigo produkto longo estas prefere 100-150bp.
Dezajnaj enkondukoj en la sekundara struktura areo de la ŝablono devas esti evititaj kiel eble plej multe.
Evitu la formadon de 2 aŭ pli komplementaj bazoj inter la 3′ finoj de kontraŭfluaj kaj laŭfluaj enkondukoj.
Primer 3′ fina bazo ne povas ĉeesti kun 3 aldonaj sinsekvaj G aŭ C.
La enkondukoj mem ne povas havi komplementajn strukturojn, alie formiĝos harpingla strukturo, influante PCR-plifortigon.
ATCG devas esti distribuita kiel eble plej egale en la enkonduka sekvenco, kaj la 3′ fina bazo devus esti evitita kiel T.
Apendico 1: Komponaĵa suplementa pako de Cell Direct RT-qPCR Kit
1.Ĉela Liza Solvo
| |||
Kit-komponantoj (24-puto lizsistemo/puto) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Partomi | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartoII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Miksaĵo
| |
Kit-komponantoj (20 μl reagsistemo) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Rekta RT Miksaĵo | 800 μl |
RNazo-Libera ddH2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Kit-komponantoj (20 μl reagsistemo) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Rekta qPCR Miksaĵo-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX-Referenca Tinkturo | 40 μl | 200 μl |
RNazo-Libera ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |