• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Ĉela Rekta RT qPCR Ilaro—SYBR GREEN I Rekta Ĉela Lizo Ĉelo Preta Unupaŝa qRT-PCR Ilaro

Ilaro Priskribo:

Kat.No.DRT-01011/01012

Por ĉelo rekta RT-qPCR uzanta 10-1,000,000 ĉelojn,

kaj elfarante RT-qPCR rekte de ĉeloj sen antaŭa RNA-purigo.

Ĉeloj estas lizitaj rekte por liberigi RNA por RT-qPCR;la alta tolerema sistemo faras nenecesa purigi RNA kaj rekte uzi ĉellisatojn kiel RNA-ŝablonojn por RT-reagoj.Rapida kaj oportuna;alta sentemo, forta specifeco kaj bona stabileco.

◮Simpla kaj efika: kun Cell Direct RT-teknologio, RNA-provaĵoj povas esti akiritaj en nur 7 minutoj.

La specimena postulo estas malgranda, eĉ 10 ĉeloj povas esti provitaj.

◮Alta trafluo: ĝi povas rapide detekti RNA en ĉeloj kultivitaj en 384, 96, 24, 12, 6-putaj platoj.

DNA Eraser povas rapide forigi liberigitajn genarojn, multe redukti la efikon al postaj eksperimentaj rezultoj.

Optimumigita RT kaj qPCR-sistemo igas la du-ŝtupan RT-PCR-inversan transskribon pli efika kaj PCR pli specifa, kaj pli imuna al RT-qPCR-reakinhibitoroj.


Produkta Detalo

Produktaj Etikedoj

Oftaj Demandoj

Elŝutu rimedojn

Priskriboj

Ĉi tiu ilaro uzas unikan lizbufrsistemon, kiu povas rapide liberigi RNA de kulturitaj ĉelprovaĵoj por RT-qPCR-reagoj, tiel forigante la tempopostulan kaj penigan RNA-purigan procezon.La RNA-ŝablono povas esti akirita en nur 7 minutoj.La 5×Rekta RT Miksaĵo kaj 2×Rektaj qPCR Mix-SYBR-reakciiloj provizitaj de la ilaro povas rapide kaj efike akiri realtempajn kvantajn PCR-rezultojn.

5×Rekta RT Miksaĵo kaj 2×Rekta qPCR Mix-SYBR havas fortan inhibitoran toleremon, kaj la lisato de la provaĵoj povas esti uzata kiel ŝablono por RT-qPCR rekte.Ĉi tiu ilaro enhavas la unikan RNA-alt-afinecan Foregene inversan transkriptazon, kaj Hot D-Taq DNA-polimerazon, dNTPojn, MgCl.2, reagbufro, PCR-optimumiganto kaj stabiligilo.

Specifoj

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Kit-komponantoj

Parto I

Buffer CL

Foregene Protease Plus II

Buffer ST

Parto II

DNA Eraser

5× Rekta RT Miksaĵo

2× Rekta qPCR Miksaĵo-SYBR

50× ROX-Referenca Tinkturo

RNazo-Libera ddH2O

Instrukcioj

Trajtoj & avantaĝoj

Simpla kaj efika: kun Cell Direct RT-teknologio, RNA-provaĵoj povas esti akiritaj en nur 7 minutoj.

■ La specimena postulo estas malgranda, tiel malalta kiel 10 ĉeloj povas esti provitaj.

■ Alta rendimento: ĝi povas rapide detekti RNA en ĉeloj kultivitaj en 384, 96, 24, 12, 6-putoplatoj.

■ DNA Eraser povas rapide forigi liberigitajn genarojn, multe redukti la efikon al postaj eksperimentaj rezultoj.

■ Optimumigita RT kaj qPCR-sistemo igas la du-paŝan inversan transskribon de RT-PCR pli efika kaj PCR pli specifa, kaj pli imuna al RT-qPCR-reakciaj inhibidores.

Kit-aplikaĵo

Amplekso de apliko: kulturitaj ĉeloj.

- RNA liberigita per specimena lizo: nur aplikebla al la ŝablono RT-qPCR de ĉi tiu ilaro.

- La ilaro povas esti uzata por la sekvaj celoj: analizo de genesprimo, konfirmo de siRNA-mediata gena silentiga efiko, ekzamenado de drogoj ktp.

Diagramo

Cell Direct RT qPCR-diagramo

Stokado kaj Konsumodaŭro

Parto I de ĉi tiu ilaro devas esti stokita ĉe 4℃;Parto II devas esti stokita ĉe -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II devas esti stokita ĉe 4℃, ne frostiĝu ĉe -20 ℃.

 Reakciilo 2×Rekta qPCR Mix-SYBR devus esti stokita ĉe -20en la mallumo;se uzata ofte, ĝi ankaŭ povas esti stokita ĉe 4℃ por mallongdaŭra konservado (uzu ene de 10 tagoj).


  • Antaŭa:
  • Sekva:

  • Real Time PCR-komencaj dezajnaj principoj

    Antaŭen Enkonduko kaj Inversa Enkonduko

    Por Real Time PCR, primer-dezajno estas tre grava.Enkondukoj estas rilatitaj al la specifeco kaj efikeco de PCR-plifortigo, kaj povas esti dizajnitaj rilate al la sekvaj principoj:

    Primer-longo: 18-30bp.

    GC enhavo: 40-60%.

    Tm-valoro: Primer-dezajnosoftvaro, kiel ekzemple Primer 5, povas doni la Tm-valoron de la enkonduko.La Tm-valoroj de la kontraŭfluaj kaj kontraŭfluaj enkondukoj devus esti kiel eble plej proksimaj.Oni povas ankaŭ uzi la kalkulformularon de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Dum elfarado de PCR, temperaturo sub la enkonduka Tm-valoro de 5 °C estas ĝenerale elektita kiel la kalcia temperaturo (la ekvivalenta pliiĝo en la kalcia temperaturo povas pliigi la specifecon de la PCR-reago).

    Enkondukoj kaj PCR-produktoj:

    Dezajno primer PCR plifortigo produkto longo estas prefere 100-150bp.

    Dezajnaj enkondukoj en la sekundara struktura areo de la ŝablono devas esti evititaj kiel eble plej multe.

    Evitu la formadon de 2 aŭ pli komplementaj bazoj inter la 3′ finoj de kontraŭfluaj kaj laŭfluaj enkondukoj.

    Primer 3′ fina bazo ne povas ĉeesti kun 3 aldonaj sinsekvaj G aŭ C.

    La enkondukoj mem ne povas havi komplementajn strukturojn, alie formiĝos harpingla strukturo, influante PCR-plifortigon.

    ATCG devas esti distribuita kiel eble plej egale en la enkonduka sekvenco, kaj la 3′ fina bazo devus esti evitita kiel T.

    Apendico 1: Komponaĵa suplementa pako de Cell Direct RT-qPCR Kit

    1.Ĉela Liza Solvo


    Ĉela Liza Solvo

    Kit-komponantoj

    (24-puto lizsistemo/puto)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    Partomi

    Buffer CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Buffer ST

    1 ml × 2

    10 ml

    PartoII

    DNA Eraser

    400 μl

    1 ml × 2

    2.RT Miksaĵo


    RT Miksaĵo

    Kit-komponantoj

    (20 μl reagsistemo)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× Rekta RT Miksaĵo

    800 μl

    RNazo-Libera ddH2O

    1,7 ml × 2

     

    3.qPCR Miksaĵo


    qPCR Miksaĵo

    Kit-komponantoj

    (20 μl reagsistemo)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 T

    2× Rekta qPCR Miksaĵo-SYBR

    1 ml × 2

    1,7 ml × 6

    50× ROX-Referenca Tinkturo

    40 μl

    200 μl

    RNazo-Libera ddH2O

    1,7 ml

    10 ml

    Instrukciaj Manlibroj:

    QuickEasyTM Cell Direct RT-qPCR Kit-SYBR Green I

    Skribu vian mesaĝon ĉi tie kaj sendu ĝin al ni