• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Ĉelo Total RNA Isolation Kit Total RNA Isolation Purification Kits de ĉelo

Ilaro Priskribo:

Tre purigita kaj altkvalita totala RNA povas esti akirita de diversaj kulturitaj ĉeloj en 11 minutoj.

RNazo-Libera

Funkciigite ĉe ĉambra temperaturo (15-25 ℃)

Kun DNA-Puriga Kolumno

Alta RNA-rendimento

Rapida: Finu eltiron en 11 minutoj

Sekureco: Neniu Organika kemiaĵo

antaŭgena forto


  • :
  • Produkta Detalo

    Produktaj Etikedoj

    Oftaj Demandoj

    Priskribo

    Ĉi tiu ilaro uzas la spinkolumnon kaj formulon evoluigitan de Foregene, kiu povas efike ĉerpi altpuran kaj altkvalitan totalan RNA de ĉeloj kultivitaj en 96, 24, 12, kaj 6-putoj teleroj.

    La ilaro disponigas efikan DNA-Puriga Kolumnon, kiu povas facile apartigi la supernatanton kaj ĉelan lizaton, ligi kaj forigi genoman DNA.La operacio estas simpla kaj tempoŝpara.

    TLa RNA-nur-Kolumno povas efike ligi RNA per unika formulo.Granda nombro da provaĵoj povas esti procesitaj samtempe.

    Kit-komponantoj

    Kit-komponado RE-03111 RE-03114
    50 T 200 T
    Bufro cRL1* 25 ml 100 ml
    Bufro cRL2 15 ml 60 ml
    Bufro RW1* 25 ml 100 ml
    Bufro RW2 24 ml 96 ml
    RNazo-Libera ddH2O 10 ml 40 ml
    RNA-Nur-Kolumno 50 200
    DNA-Puriga Kolumno 50 200
    Instruo 1 1

    *Bonvolu porti gantojn kaj preni protektajn rimedojn dum la operacio, ĉar Buffer cRL1 kaj Buffer RW1 enhavas irritajn kaotropajn salojn.

    Trajtoj & avantaĝoj

    ■ La tuta procezo funkcias ĉe ĉambra temperaturo (15-25℃), sen glacia bano kaj malalta temperaturo centrifugado.
    ■ La tuta ilaro estas RNase-Libera, ne necesas zorgi pri RNA-degradado.
    ■ DNA-Puriga Kolumno specife ligas DNA, tiel ke la ilaro povas forigi genoman DNA-poluadon sen aldoni plian DNazon.
    ■ Alta RNA-rendimento: nur RNA-Kolumno kaj unika formulo povas efike purigi RNA.
    ■ Rapida rapido: facile operaciebla kaj kompletigebla en 11 minutoj.
    ■ Sekureco: Ne necesas organika reakciilo.
    ■ Altkvalita: La purigita RNA estas de alta pureco, libera de proteino kaj aliaj malpuraĵoj, kaj povas renkonti diversajn postajn eksperimentojn.

    avantaĝoj de foregene RNA-Izola ilaro

    Kit-aplikaĵo

    Ĝi taŭgas por eltiro kaj purigo de totala RNA de kulturitaj ĉeloj en 96, 24, 12, kaj 6-putoplatoj.

    Laborfluo

    ĉela totala RNA

    Diagramo

    Ĉela Totala RNA-Izola Ilaro Laborfluo1

    La agarosa ĝela baterio-diagramo de Cell Total RNA Isolation Kit traktis la supre malsamajn nombrojn da ĉeloj, 20μl volumo eluo, prenu 2μl purigita totala RNA 1%.

    Stokado kaj konservado

    La ilaro povas esti konservita dum 12 monatoj ĉe ĉambra temperaturo (15–25 ℃) aŭ 2–8 ℃ por pli longa tempo (24 monatoj).

    Buffer cRL1 povas esti stokita je 4 ℃ dum 1 monato post aldonado de 2-hidroksi-1-etanetiol (laŭvola).


  • Antaŭa:
  • Sekva:

  • RNA ne estas ĉerpita aŭ RNA-rendimentoj estas malaltaj

    Ofte ekzistas diversaj faktoroj, kiuj influas reakivan efikecon, kiel ekzemple: histoprovaĵenhavo de RNA, metodo de operacio, eluovolumeno, ktp.

    1. Glacia bano aŭ kriogena (4 °C) centrifugado estis farita dum operacio.

    Rekomendo: Funkcii ĉe ĉambra temperaturo (15-25 °C) dum la tuta procezo, ne glacibanu kaj centrifugu ĉe malaltaj temperaturoj.

    2. Nedeca specimena konservado aŭ troa specimena konservado.

    Rekomendo: Konservu specimenojn ĉe -80 °C aŭ frostiĝu en likva nitrogeno kaj evitu ripetan frostig-degelon;provu uzi freŝan histon aŭ kulturitajn ĉelojn por RNA-eltiro.

    3. Nesufiĉa specimena lizo.

    Rekomendo: Kiam homogenigas histon, certigu, ke la histo estas sufiĉe homogenigita kaj ke la histoĉeloj estas sufiĉe dividitaj por klarigi la liberigon de RNA.

    4. La eluvaĵo ne estas ĝuste aldonita.

    Rekomendo: Konfirmu, ke RNase-Free ddH2O estas aldonita gute al la mezo de la puriga kolonmembrano.

    5. La ĝusta volumo de absoluta etanolo ne estis aldonita al Buffer RL2 aŭ Buffer RW2.

    Rekomendo: Sekvu la instrukciojn, aldonu la ĝustan volumon de absoluta etanolo al Buffer RL2 kaj Buffer RW2 kaj miksu bone antaŭ ol uzi la ilaron.

    6. Dozo de specimeno de histo ne taŭgas.

    Rekomendo: Uzu 10-20 mg da histo aŭ (1-5) × 106ĉeloj per 500 μl bufro RL1, ĉar troa histouzo povas rezultigi reduktitan RNA-ekstraktadon.

    7. Nedeca eluciovolumo aŭ nekompleta elucio.

    Rekomendo: La elucia volumo de la puriga kolumno estas 50-200 μl;se la elucia efiko ne estas kontentiga, oni rekomendas plilongigi la ĉambran temperaturon-lokigan tempon post aldoni antaŭvarmigitan RNase-Free ddH.2O, ekz. dum 5-10 min.

    8.La puriga kolumno havas etanolan restaĵon post Buffer RW2-lavo.

    Rekomendo: Se estas etanola restaĵo post lavado de Buffer RW2, malplena tubo centrifugado dum 1 min, la tempo por la malplena tubo centrifuga operacio povas esti pliigita al 2 min, aŭ la puriga kolumno povas esti metita ĉe ĉambra temperaturo dum 5 minutoj por adekvate forigi la restaĵon. etanolo.

    Purigita RNA estas degradita

    La kvalito de la purigita RNA estas rilatita al faktoroj kiel ekzemple la konservado de la provaĵo, RNase-poluado, kaj manipulado, ktp.

    1. Specimenoj de histo ne estas konservitaj ĝustatempe.

    Rekomendo: Se histoprovaĵoj aŭ ĉeloj ne estas uzataj ĝustatempe post kolekto, tuj kriokonservu je -80 °C aŭ likva nitrogeno.Por ĉerpi RNA, uzu ĵus prenitan histon aŭ ĉelan specimenon kiam ajn eblas.

    2. Ripeta frosto-degelo de histoprovaĵoj.

    Rekomendo: Dum stokado de histoprovaĵoj, estas plej bone tranĉi ilin en malgrandajn pecojn por konservado, kaj forigi unu el la pecoj kiam ili uzas ilin por eviti ripetan frostig-degelon de la specimeno kaj la degeneron de RNA.

    3. RNase estas enkondukita aŭ ne portanta forĵeteblajn gantojn, maskojn, ktp dum la operacio.

    Rekomendo: RNA-ekstraktado-eksperimentoj estas plej bone faritaj en apartaj RNA-manipuladĉambroj kaj la tablo estas malbarita antaŭ la eksperimento.

    Portu foruzeblajn gantojn kaj maskojn dum la eksperimento por minimumigi RNA-degeneron kaŭzitan de la enkonduko de RNase.

    4. Reactivoj estas poluitaj per RNase dum uzo.

    Rekomendo: Anstataŭigi per nova Besta Totala RNA-Izola Ilaro por rilataj eksperimentoj.

    5. La centrifugilaj tuboj, pintoj ktp uzataj en RNA-manipulado estas poluitaj per RNase.

    Rekomendo: Konfirmu, ke la centrifugilaj tuboj, pintoj, pipetoj ktp uzataj en RNA-eltiro estas ĉiuj RNase-Senaj.

    Purigita akirita RNA influas kontraŭfluajn eksperimentojn

    RNA purigita de la purigo kolumno, se la salo jonoj, proteino enhavo estas tro granda influos la kontraŭflua eksperimento, kiel: inversa transskribo,Northern Blot et al.

    1. La eluita RNA havas saljonajn restaĵojn.

    Rekomendo: Konfirmu, ke la ĝusta volumo de etanolo estis aldonita al Buffer RW2 kaj faru 2 purigajn kolumnlavojn ĉe la centrifuga rapido indikita por operacio;se ekzistas iu sala jona restaĵo, lasu la purigan kolumnon al Buffer RW2 dum 5 minutoj ĉe ĉambra temperaturo kaj faru centrifugadon por maksimumigi la forigon de salo-poluado.

    2. Etanola restaĵo en eluita RNA.

    Rekomendo: Konfirmu, ke post la lavado de bufro RW2, faru la malplenan tuban centrifugan operacion je la centrifuga rapido indikita por operacio, pliigu la tempon de la malplenan tuban centrifugan operacion al 2 minutoj se ankoraŭ estas etanola restaĵo, aŭ lasu ĝin ĉe ĉambra temperaturo por 5 minutoj. m

    Skribu vian mesaĝon ĉi tie kaj sendu ĝin al ni