• facebook
  • linkedin
  • youtube
standardo

Klarigo de bazaj molekula biologiaj terminoj

Ilaro de Molekula Biologio

1. cDNA kaj cccDNA: cDNA estas duoble-fadena DNA sintezita per inversa transkriptazo de mRNA;cccDNA estas plasmido duoble-fadena fermita cirkla DNA libera de la kromosomo.
2. Norma fald-unuo: la proteina malĉefa strukturo-unuo α-helico kaj β-folio povas formi strukturajn blokojn kun specialaj geometriaj aranĝoj per diversaj konektaj polipeptidoj.Ĉi tiu speco de determinita faldado estas kutime nomita supersekundara strukturo.Preskaŭ ĉiuj terciaraj strukturoj povas esti priskribitaj per ĉi tiuj faldeblaj tipoj, kaj eĉ iliaj kombinitaj tipoj, do ili ankaŭ estas nomitaj normaj faldeblaj unuoj.
3. ĈAPO: cikla adenosina monofosfato (cAMP) ricevilo proteino CRP (cAMP ricevilo proteino), la komplekso formita post la kombinaĵo de cAMP kaj CRP estas nomita aktiviga proteino CAP (cAMP aktivigita proteino)
4. Palindroma sekvenco: La inversa komplementa sekvenco de segmento de DNA-fragmento, ofte restrikta enzimejo.
5. micRNA: Komplementa interferanta RNA aŭ kontraŭsensa RNA, kiu estas komplementa al la mRNA-sekvenco kaj povas malhelpi la tradukon de mRNA.
6. Ribozimo: RNA kun kataliza agado, kiu ludas aŭtokatalizan rolon en la splisadprocezo de RNA.
7. Motivo: Estas kelkaj lokaj regionoj kun simila tridimensia formo kaj topologio en la spaca strukturo de proteinaj molekuloj
8. Signal-peptido: peptido kun 15-36 aminoacidaj restaĵoj ĉe la N-finaĵo dum proteinsintezo, kiu gvidas la transmembranon de la proteino.
9. Atenuilo: Nukleotidsekvenco inter operacianta regiono kaj struktura geno kiu finas transskribon.
10. Magia Makulo: Kiam la bakterioj kreskas kaj renkontas kompletan mankon de aminoacidoj, la bakterioj produktos kriz-respondon por ĉesigi la esprimon de ĉiuj genoj.La signaloj kiuj generas tiun krizrespondon estas guanozintetrafosfato (ppGpp) kaj guanozina pentafosfato (pppGpp).La rolo de PpGpp kaj pppGpp ne estas nur unu aŭ kelkaj operonoj, sed influas grandan nombron da ili, do ili estas nomitaj superreguligantoj aŭ magiaj makuloj.
11. Kontraŭflua reklamelemento: rilatas al la DNA-sekvenco kiu ludas reguligan rolon en la agado de la iniciatinto, kiel ekzemple TATA en la -10-regiono, TGACA en la -35-regiono, plifortigantoj, kaj mildigiloj.
12. DNA-sondilo: etikedita segmento de DNA kun konata sekvenco, kiu estas vaste uzata por detekti nekonatajn sekvencojn kaj ekzameni celgenojn.
13. SD-sekvenco: Ĝi estas la liga sekvenco de ribosomo kaj mRNA, kiu reguligas tradukadon.
14. Monoclonal Antikorpo: Antikorpo kiu agas nur kontraŭ unu sola antigena determinanto.
15. Kosmido: Ĝi estas artefarite konstruita eksogena DNA-vektoro kiu retenas la COS-regionojn ĉe ambaŭ finoj de la fago kaj estas konektita al la plasmido.
16. Blu-blanka makulo-ekrano: LacZ-geno (kodiganta β-galaktosidase), la enzimo povas malkomponi la kromogenan substraton X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galaktozido) por produkti bluan, tiel farante la streĉon blua.Kiam la eksogena DNA estas enigita, la LacZ-geno ne povas esti esprimita, kaj la trostreĉiĝo estas blanka, por ekzameni la rekombinajn bakteriojn.Tio estas nomita blublanka rastrumo.
17. Cis-aganta elemento: Specifa sekvenco de bazoj en DNA kiu reguligas gen-esprimon.
18. Klenow-enzimo: Granda fragmento de DNA-polimerazo I, krom ke la 5' 3' eksonukleaza agado estas forigita de la DNA-polimerazo I-holoenzimo
19. Ankrita PCR: uzata por plifortigi la interesan DNA kun konata sekvenco ĉe unu fino.Poli-dG-vosto estis aldonita al unu fino de la nekonata sekvenco, kaj tiam la poli-dC kaj la konata sekvenco estis utiligitaj kiel enkondukoj por PCR-plifortigo.
20. Fuzia proteino: La geno de eŭkariota proteino estas ligita kun eksogena geno, kaj la proteino kunmetita de la traduko de origina genproteino kaj eksogena proteino estas esprimita samtempe.

Aliaj molekula biologiaj terminoj

1. La fizika mapo de DNA estas la ordo en kiu la (restrikto-endonukleaz-digestita) fragmentoj de la DNA-molekulo estas aranĝitaj.
2. La fendetaĵo de RNase estas dividita en du tipojn (aŭtokatalizo) kaj (heterokatalizo).
3. Estas tri komencaj faktoroj en prokariotoj estas (IF-1), (IF-2) kaj (IF-3).
4. Transmembranaj proteinoj postulas gvidadon (signalaj peptidoj), kaj la rolo de proteinaj ŝaperonoj estas (helpas faldi la peptidan ĉenon en la indiĝenan formo de la proteino).
5. Elementoj en reklamantoj ĝenerale povas esti dividitaj en du tipojn: (kernaj promociantaj elementoj) kaj (kontraŭfluaj promociantaj elementoj).
6. La esplorenhavo de molekula biologio ĉefe inkluzivas tri partojn: (struktura molekula biologio), (gena esprimo kaj reguligo), kaj (DNA-rekombinita teknologio).
7. La du ŝlosilaj eksperimentoj pruvantaj ke DNA estas la genetika materialo estas (pneŭmokoko-infekto de musoj) kaj (T2-fago-infekto de Escherichia coli).potencialo).
8. Estas du ĉefaj diferencoj inter hnRNA kaj mRNA: (hnRNA estas splisita en la procezo de konvertiĝo en mRNA), (la 5' fino de la mRNA estas aldonita kun m7pGppp ĉapo, kaj ekzistas ekstra poliadeniligo ĉe la 3' fino de la mRNA-acida (poliA) vosto).
9. La avantaĝoj de la multi-subunua formo de proteino estas (subunuo estas ekonomia metodo por DNA-utiligo), (povas redukti la efikon de hazardaj eraroj en proteinsintezo sur proteina aktiveco), (aktiveco povas esti tre efike kaj rapide estas malfermitaj). kaj fermita).
10. La ĉefa enhavo de proteina faldmekanismo unua nuklea teorio inkluzivas (nukleado), (struktura riĉigo), (fina rearanĝo).
11. Galaktozo havas duoblan efikon sur bakterioj;unuflanke (ĝi povas esti uzata kiel karbona fonto por ĉela kresko);aliflanke (ĝi estas ankaŭ komponanto de la ĉela muro).Tial, cAMP-CRP-sendependa reklamanto S2 estas necesa por la permanenta sintezo sur la fonnivelo;samtempe, cAMP-CRP-dependa reklamanto S1 estas necesa por reguligi la altnivelan sintezon.Transskribo komenciĝas de (S2) kun G kaj de (S1) sen G.
12. Rekombina DNA-teknologio estas ankaŭ konata kiel (gena klonado) aŭ (molekula klonado).La fina celo estas (transdoni la genetikan informon DNA en unu organismo en alian organismon).Tipa DNA-rekombinigeksperimento kutime inkluzivas la sekvajn paŝojn: (1) Ekstraktu la celgenon (aŭ eksogenan genon) de la donacorganismo, kaj enzimeme ligu ĝin al alia DNA-molekulo (klona vektoro) por formi novan rekombinan DNA-molekulon.② La rekombina DNA-molekulo estas translokigita en la ricevan ĉelon kaj reproduktitan en la ricevan ĉelon.Ĉi tiu procezo nomiĝas transformo.③ Ekranu kaj identigu tiujn ricevajn ĉelojn, kiuj sorbis la rekombinan DNA.④Kultivu la ĉelojn enhavantajn rekombinan DNA en grandaj kvantoj por detekti ĉu la fremdhelpa geno estas esprimita.
13. Estas du specoj de reproduktado de plasmidaj: tiuj, kiuj estas strikte kontrolataj per gastiga ĉela proteinsintezo, estas nomitaj (streĉaj plasmidoj), kaj tiuj kiuj ne estas strikte kontrolitaj per gastiga ĉela proteinsintezo estas nomitaj (malstreĉaj plasmidoj).
14. La PCR-reaga sistemo havu la jenajn kondiĉojn: a.DNA-enkondukoj (ĉirkaŭ 20 bazoj) kun komplementaj sekvencoj ĉe ĉiu fino de la du fadenoj de la celgeno esti apartigita.b.Enzimoj kun termika stabileco kiel ekzemple: TagDNA polimerazo.c, dNTPd, DNA-sekvenco de intereso kiel ŝablono
15. La baza reagprocezo de PCR inkluzivas tri stadiojn: (malnaturado), (rekuado) kaj (etendo).
16. La baza procezo de transgenaj bestoj kutime inkluzivas: ①Enkonduko de klonita fremda geno en la kernon de fekunda ovo aŭ embria stamĉelo;②Transplantado de la inokulita fekunda ovo aŭ embria stamĉelo en la inan uteron;③Kompleta embria evoluo kaj kresko Por la idoj kun fremdaj genoj;④ Uzu ĉi tiujn bestojn, kiuj povas produkti fremdajn proteinojn kiel bredajn stokojn por bredi novajn homozigotajn liniojn.
17. Hibridomaj ĉellinioj estas generitaj per hibridigado de (lieno B) ĉeloj kun (mjelomaj) ĉeloj, kaj ĉar (lienaj ĉeloj) povas utiligi hipoksantinon kaj (ostaj ĉeloj) disponigi ĉeldividajn funkciojn, ili povas esti kreskigitaj en HAT-medio.kreski.
18. Kun la profundiĝo de esplorado, la unua generacio de antikorpoj nomiĝas (poliklonaj antikorpoj), la dua generacio (monoklonaj antikorpoj), kaj la tria generacio (genetika inĝenierado antikorpoj).
19. Nuntempe, la genetika inĝenierado de insektaj virusoj estas ĉefe fokusita al bakuloviruso, kiu manifestiĝas en la enkonduko de (eksogene toksina geno);(genoj, kiuj interrompas la normalan vivociklon de insektoj);(modifo de virusgenoj).
20. La trans-agaj proteinfaktoroj respondaj al la komunaj elementoj TATA, GC, kaj CAAT en la mamula RNA-polimerazo II-reklamanto estas (TFIID), (SP-1) kaj (CTF/NF1), respektive.
dudek unu.La bazaj transkripcifaktoroj de RNA-polimerazo Ⅱ estas, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, kaj ilia liga sekvenco estas: (D, A, B, E).Kie la funkcio de TFII-D estas (liganta al TATA-skatolo).
dudek du.La plej multaj el la transkripcifaktoroj kiuj ligas al DNA funkcias en la formo de dimeroj.La funkciaj domajnoj de transkripcifaktoroj kiuj ligas al DNA estas ofte la sekvaj (helico-turn-helico), (zinka fingroĉeftemo), (baz-leŭcina) zipĉeftemo).
dudek tri.Ekzistas tri specoj de restriktaj endonukleazaj interrompaj reĝimoj: (tranĉita ĉe la 5' flanko de la simetria akso por generi 5' gluiĝemajn finojn), (tranĉita ĉe la 3' flanko de la simetria akso por generi 3' gluiĝemajn finojn (tranĉita ĉe la simetria akso por generi platajn segmentojn) ).
dudek kvar.Plasmida DNA havas tri malsamajn agordojn: (SC-agordo), (oc-agordo), (L-agordo).La unua en elektroforezo estas (SC-agordo).
25. Eksogenaj gen-esprimsistemoj, ĉefe (Escherichia coli), (Gisto), (Insekto) kaj (Mamula ĉeltabelo).
26. La kutime uzataj metodoj por transgenaj bestoj estas: (metodo de retrovirusa infekto), (metodo de mikroinjekto de DNA), (metodo de embriaj stamĉeloj).

Apliko Molekula biologio

1. Nomu la funkciojn de pli ol 5 RNA-oj?
Transiga RNA tRNA Transiga aminoacido Ribosome RNA rRNA Ribosome konsistigas mesaĝiston RNA mRNA Proteina sinteza ŝablono Heterogena nuklea RNA hnRNA Antaŭulo de matura mRNA malgranda nuklea RNA snRNA Implikita en hnRNA-splisado Malgranda citoplasma RNA scRNA/7SL-RNA proteino Plasma retikulo-signal-rekono lokalizita korpaj komponantoj Kontraŭsenca RNA anRNA/micRNA Reguligas genesprimon Ribozima RNA Enzime aktiva RNA
2. Kio estas la ĉefa diferenco inter prokariotaj kaj eŭkariotaj iniciatintoj?
Prokariota TTGACA --- TATAAT------Initiation Site-35 -10 Eukaryotic Enhancer---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-Initiation Site-110 -70 -25
3. Kiuj estas la ĉefaj aspektoj de artefarita konstruado de naturaj plasmidoj?
Naturaj plasmidoj ofte havas difektojn, do ili ne taŭgas por uzo kiel portantoj por genetika inĝenierado, kaj devas esti modifitaj kaj konstruitaj: a.Aldonu taŭgajn elektajn markilojn, kiel du aŭ pli, kiuj estas facile uzeblaj por selektado, kutime antibiotikaj genoj.b.Pliigi aŭ malpliigi taŭgajn enzimajn tranĉejojn por faciligi rekombinigon.c.Mallongigu la longon, fortranĉu nenecesajn fragmentojn, plibonigu la importan efikecon kaj pliigu la ŝarĝan kapablon.d.Ŝanĝu la replikon, de malloza al malfiksa, de malpli da kopioj al pli da kopioj.e.Aldonu specialajn genetikajn elementojn laŭ la specialaj postuloj de genetika inĝenierado
4. Donu ekzemplon de metodo por diferenciga kribrado de histo-specifa cDNA?
Du ĉelpopulacioj estas pretaj, la celgeno estas esprimita aŭ alte esprimita en unu el la ĉeloj, kaj la celgeno ne estas esprimita aŭ malalte esprimita en la alia ĉelo, kaj tiam la celgeno estas trovita per hibridigo kaj komparo.Ekzemple, dum la okazo kaj evoluo de tumoroj, tumorĉeloj prezentos mRNA-ojn kun malsamaj esprimniveloj ol normalaj ĉeloj.Tial, tumor-rilataj genoj povas esti ekzamenitaj per diferenciga hibridigo.La induktometodo ankaŭ povas esti uzita por ekzameni la genojn kies esprimo estas induktita.
5. Generacio kaj kribrado de hibridoma ĉellinioj?
Lienaj B-ĉeloj + mielomaj ĉeloj, aldonu polietilenglikolon (PEG) por antaŭenigi ĉelfandadon, kaj la lienaj B-mjelomaj fuzioĉeloj kreskigitaj en HAT-mezo (enhavantaj hipoxantinon, aminopterinon, T) daŭre disetendiĝas nutras.La ĉelfandado enhavas: lieno-lienan fandajn ĉelojn: nekapablaj kreski, lienaj ĉeloj ne povas esti kulturitaj en vitro.Osto-ostaj fuzioĉeloj: ne povas utiligi hipoksantinon, sed povas sintezi purinon tra la dua pado uzante folatreduktazon.Aminopterin malhelpas folatreduktazon kaj tiel ne povas kreski.Ost-lienaj fuzioĉeloj: povas kreski en ĈAPELO, lienoĉeloj povas utiligi hipoksantinon, kaj ostĉeloj disponigas ĉeldividan funkcion.
6. Kio estas la principo kaj metodo por determini la primaran strukturon de DNA per la dideoksia fina finmetodo (metodo Sanger)?
La principo estas uzi nukleotidan ĉenterminilon - 2,,3,-dideoxynucleotide por fini la etendaĵon de DNA.Ĉar al ĝi mankas la 3-OH bezonata por la formado de 3/5/fosfodisteraj ligoj, post kiam integrite en la DNA-ĉeno, la DNA-ĉeno ne povas esti plue etendita.Laŭ la principo de bazparigo, kiam ajn DNA-polimerazo bezonas dNMP por partopreni en la normale etendita DNA-ĉeno, ekzistas du eblecoj, unu estas partopreni en ddNTP, kiu rezultigas la finon de deoksinucleotida ĉeno-etendo;la alia estas partopreni en dNTP , tiel ke la DNA-ĉeno daŭre povas daŭri etendiĝi ĝis la venonta ddNTP estas integrigita.Laŭ tiu metodo, grupo de DNA-fragmentoj de malsamaj longoj finiĝantaj per ddNTP povas esti akirita.La metodo estas dividi en kvar grupojn respektive ddAMP, ddGMP, ddCMP, kaj ddTMP.Post la reago, poliakrilamida ĝelelektroforezo povas legi la DNA-sekvencon laŭ la naĝantaj bandoj.
7. Kio estas la pozitiva reguliga efiko de aktiviga proteino (CAP) sur transskribo?
Cikla adenilato (cAMP) receptorproteino CRP (cAMP receptorproteino), la komplekso formita per la kombinaĵo de cAMP kaj CRP estas nomita CAP (cAMPactivated proteino).Kiam E. coli estas kreskigita en medio malhavanta glukozon, la sintezo de CAP pliiĝas, kaj CAP havas la funkcion de aktivigo de reklamantoj kiel laktozo (Lac).Al kelkaj CRP-dependaj reklamantoj mankas la tipa -35-regiona sekvencotrajto (TTGACA) kiun oftaj reklamantoj havas.Tial, estas malfacile por RNA-polimerazo ligi al ĝi.La ĉeesto de CAP (funkcio): povas signife plibonigi la ligan konstanton de enzimo kaj iniciatinto.Ĝi ĉefe montras la jenajn du aspektojn: ① CAP helpas la enzimmolekulon ĝuste orientiĝi ŝanĝante la konformiĝon de la iniciatinto kaj la interago kun la enzimo, por kombini kun la -10-regiono kaj ludi la rolon de anstataŭigi la funkcion de la -35 regiono.②CAP ankaŭ povas malhelpi la ligon de RNA-polimerazo al aliaj ejoj en DNA, tiel pliigante la probablecon ligi al ĝia specifa iniciatinto.
8. Kiuj paŝoj estas kutime inkluzivitaj en tipa DNA-rekombiniga eksperimento?
a.Eltiru la celgenon (aŭ eksogenan genon) de la donacorganismo, kaj enzimeme ligu ĝin al alia DNA-molekulo (klona vektoro) por formi novan rekombinan DNA-molekulon.b.Transloku la rekombinan DNA-molekulon en la ricevan ĉelon kaj reproduktu kaj konservu ĝin en la ricevan ĉelon.Ĉi tiu procezo nomiĝas transformo.c.Ekranu kaj identigu tiujn ricevajn ĉelojn, kiuj sorbis la rekombinan DNA.d.Amaskulturo la ĉeloj enhavantaj la rekombinan DNA por detekti ĉu la eksterlanda helpgeno estas esprimita.
9. Konstruo de genbiblioteko Tri metodoj por kribrado de rekombinaĵoj estas donitaj kaj la procezo estas mallonge priskribita.
Ekzamenado de antibiotika rezisto, insercia malaktivigo de rezisto, blublanka makulkribrado aŭ PCR-kribrado, diferenciga kribrado, DNA-enketo Plej multaj klonaj vektoroj portas antibiotikajn rezistajn genojn (kontraŭ-ampicilino, tetraciclino).Kiam la plasmido estas transdonita en Escherichia coli, la bakterioj akiros reziston, kaj tiuj sen translokigo ne havos reziston.Sed ĝi ne povas distingi ĉu ĝi estis reorganizita aŭ ne.En vektoro enhavanta du rezistgenojn, se fremda DNA-fragmento estas enigita en unu el la genoj kaj igas la genon esti inaktivigita, du platkontroloj enhavantaj malsamajn medikamentojn povas esti uzitaj por ekzameni pozitivajn rekombinaĵojn.Ekzemple, la pUC-plasmido enhavas la LacZ-genon (ĉifradan β-galaktosidase), kiu povas malkomponi la kromogenan substraton X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galaktozido) por produkti bluon, tiel. bluigante la streĉon.Kiam la fremda DNA estas enigita, la LacZ-geno ne povas esti esprimita, kaj la trostreĉiĝo estas blanka, por ekzameni la rekombinajn bakteriojn.
10. Klarigu la bazan procezon akiri transgenajn bestojn per embriaj stamĉeloj?
Embriaj stamĉeloj (ES) estas embriaj ĉeloj dum embria evoluo, kiuj povas esti artefarite kulturitaj kaj multigitaj kaj havas la funkcion diferenciĝi en aliajn specojn de ĉeloj.Kulturo de ES-ĉeloj: La interna ĉelmaso de la blastocisto estas izolita kaj kulturita.Kiam ES estas kultivita en senmanĝa tavolo, ĝi diferenciĝos en diversajn funkciajn ĉelojn kiel muskolĉelojn kaj N-ĉelojn.Se kulturite en medio enhavanta fibroblastojn, ES konservos la diferencigan funkcion.ES povas esti genetike manipulita, kaj ĝia diferenciga funkcio povas esti integrita sen tuŝi ĝian diferencigan funkcion, kiu solvas la problemon de hazarda integriĝo.Enkonduku eksogenajn genojn en embriajn stamĉelojn, poste enplantu en la uteron de gravedaj inaj musoj, evoluu en idojn, kaj krucu por akiri homozigotajn musojn.