Rekta RT-qPCR Ilaro
Ilaro Priskribo:
◮ Rekta RT-qPCR Kit, uzante Foreasy Reverse Transcriptase kaj Foreasy HS Taq DNA Polymerase evoluanta de Foregene, kun unika reakcia bufro, faras ĉi tiun ilaron kun forta rezisto kaj kongruo, kaj ĝi povas rekte testi reagon uzi Foregene Lysis-sistemon kiel ŝablonon.Ĉi tiu ilaro povas kandidatiĝi por disvolvo de ilaro pri detektado de nuklea acido COVID-19 kaj aliaj patogenaj bakterioj.
Priskribo
Rekta RT-qPCR-ilaro disponigas aparte pakitan RT-qPCR-bufferon kaj altan efikan enzimonmiksaĵo (Taq、M-MLV、RI), igante ĝin oportuna por la kreado de malantaŭaj ilaroj kaj sistemojalĝustigo, ene de simpla konfirmo.
Specifoj
500T, 50,000T
Kit-komponantoj
| Enhavo de ilaro (20 μL reagsistemo) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Rekta Enzima Miksaĵo | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Rekta RT-qPCR Buffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instruo | 1 | 1 |
Funkciaj Paŝoj
Antaŭ preparado de reakciiloj, ĉiuj reakciiloj en la ilaro devas esti degelitaj ĉe ĉambra temperaturo kaj milde miksitaj.
A: Preparu of ŝablono kaj reaktivo
1. Preparu pretan RNA-ŝablonon (Estas rekomendite uzi Foregene Total RNA Isolation Kit-serio-kompleton por ĉerpi kaj purigi RNA-ŝablonon) aŭ specimeno krakanta produkton (Oni rekomendas uzi Foregene Lysis-sistemon), specifajn enkondukojn (10 μM) kaj aliajn rilatajn konsumeblajn instrumentojn.
2. Metu la 2× Rektan RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O kaj 20× ROX Referenca Tinkturo (se ĝi's bezonataj) en la skatolo kun glacio, farante ĉi tiujn fandi nature, kaj miksi milde.
B: Preparu of RT-qPCR sistemo
Tablo 1 : Preparu of RT-qPCR ssistemo
| Komponanto | Volumo | Fina koncentriĝo |
| 2× Rekta RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Rekta Enzima Miksaĵo | 1μL | |
| Antaŭen Enkonduko (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Inversa Enkonduko (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Sondo (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Ŝablono (RNA aŭ Lysate) | X μL | |
| 20×ROX-Referenca Tinkturo | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Tuta Volumo | 20μL |
C: Agordu la RT-qPCR reago programo
Tablo 2 : RT-qPCR reaction programo fikso (por ekzemplo: du-paŝo metodo)
| Paŝo | Temperaturo | Tempo | Cikloj | Enhavo | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Inversa transskribo |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Antaŭ-malnaturado | |
| 3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturado | |
| 60℃ | 30 sek 2* | Anneal/Etendado | |||
Stokado kaj Konsumodaŭro
-La ilaro estu konservita ĉe -20± 5℃.La valideca periodo estas 12 monatoj.
-Evitu ripetajn frostig-degelojn (<5 ciklojn).
