ForeDirect RT-qPCR Kit
Priskribo
ForeDirect RT-qPCR Kit estas dizajnita por RNA-rekta realtempa plifortigo de swabkolektoj sen RNA-purigaj procezoj.Ĉi tiu ilaro kompletigas la qRT-PCR-ciklojn ene de unu horo.La enzimmiksaĵo estas optimumigita miksaĵo de Inversa Transskribazo, Hot-Start Taq DNA-polimerazo, RNase-inhibitoro.La Reago-Bufro enhavas ĉiujn postulatajn komponentojn, inkluzive de optimumigitaj bufrokomponentoj, Mg2+, dUTP, kaj dNTPoj.
Specifoj
100T
Kit-komponantoj
Nukleacida eliga agento |
RNA protektanto |
2× RT-qPCR Bufro |
Enzima Miksaĵo (Taq&M-MLV) |
Instrukcioj |
PCR-apliko
1. Post kiam la PCR-reagaj tuboj estas mallonge centrifugitaj, metu ilin en la specimenan tankon de plifortiga instrumento.
2. Termika protokolo
Paŝo | Temperaturo | Tempo | Cikloj | |
1 | Inversa transskribo | 50℃ | 15 minutoj | 1 |
2 | Antaŭ-malnaturado | 95℃ | 1 min | 1 |
3 | Denaturado | 95℃ | 10 sekundoj | 42 |
4 | Anneal/Etendado | 60℃ | 30 sekundoj |
Notu:Fluoreska signalo estis detektita tuj post la etenda paŝo de ĉiu ciklo.
3. Post agordo, konservu la dosieron kaj rulu la reagprogramon.
Funkciaj Paŝoj
Antaŭ preparado de reakciiloj, ĉiuj reakciiloj en la ilaro devas esti degelitaj ĉe ĉambra temperaturo kaj milde miksitaj.
Preparado de reakciiloj
1. Preparu la Nukleika Acidan Miksaĵon
Komponanto | Volumo por Specimeno aŭ Kontrolo |
Nukleacida eliga agento | 5μL |
RNA protektanto | 0,5 μL |
2. Preparu la Reakcian Miksaĵon
Komponanto | Volumo por Specimeno aŭ Kontrolo |
2× RT-qPCR Bufro | 15 μL |
Enzima Miksaĵo (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Enkondukoj kaj Sondoj | 1μL |
Stokado kaj Konsumodaŭro
-La ilaro estu konservita ĉe -20± 5℃.La valideca periodo estas 12 monatoj.
-Evitu ripetajn frostig-degelojn (<5 ciklojn).