Malmultekosta Prezlisto por Produktado de Fabrika Ilaro de Eltiro de Plant Totala Rna
"Sincereco, Novigo, Rigoreco kaj Efikeco" estas la persista koncepto de nia firmao por tiu longtempe akiri unu kun la alia kun aĉetantoj por reciproka reciprokeco kaj reciproka rekompenco por Malmultekosta Prezlisto por Fabrikisto-Produktado de Plant Total Rna Extraction Kit, Konstante por la plimulto de komercaj entreprenaj uzantoj kaj komercistoj provizi idealajn altkvalitajn produktojn kaj bonegan servon.Varme bonvenigas aliĝi al ni, ni novigu unu kun la alia, al fluganta revo.
"Sincereco, Novigo, Rigoreco kaj Efikeco" estas la persista koncepto de nia firmao por tiu longtempe akiri unu kun la alia kun aĉetantoj por reciproka reciprokeco kaj reciproka rekompenco porĈina Plant Rna kaj Ekstrakta Ilaro, Kun teamo de sperta kaj sperta dungitaro, nia merkato kovras Sudamerikon, Usonon, Mezorienton kaj Nordafriko.Multaj klientoj fariĝis niaj amikoj post bona kunlaboro kun ni.Se vi havas la postulon por iu el niaj produktoj, certigu, ke vi kontaktu nin nun.Ni antaŭĝojis aŭdi de vi baldaŭ.
Instrukciaj Manlibroj:
"Sincereco, Novigo, Rigoreco kaj Efikeco" estas la persista koncepto de nia firmao por tiu longtempe akiri unu kun la alia kun aĉetantoj por reciproka reciprokeco kaj reciproka rekompenco por Malmultekosta Prezlisto por Fabrikisto-Produktado de Plant Total Rna Extraction Kit, Konstante por la plimulto de komercaj entreprenaj uzantoj kaj komercistoj provizi idealajn altkvalitajn produktojn kaj bonegan servon.Varme bonvenigas aliĝi al ni, ni novigu unu kun la alia, al fluganta revo.
Malmultekosta Prezlisto porĈina Plant Rna kaj Ekstrakta Ilaro, Kun teamo de sperta kaj sperta dungitaro, nia merkato kovras Sudamerikon, Usonon, Mezorienton kaj Nordafriko.Multaj klientoj fariĝis niaj amikoj post bona kunlaboro kun ni.Se vi havas la postulon por iu el niaj produktoj, certigu, ke vi kontaktu nin nun.Ni antaŭĝojis aŭdi de vi baldaŭ.
Gvidilo pri Problema Analizo
La sekva analizo de la problemoj en kiuj vi eble renkontosPlant TotaloRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
La spinkolono estas ŝtopita
Blokado de la spinkolono igos la RNA-rendimenton esti reduktita aŭ eĉ nekapabla esti purigita por akiri RNA, kaj la kvalito de la akirita RNA estos malalta.
Komuna Kaŭza Analizo:
1. La specimeno ne estas tute rompita.
Nekompleta specimena fragmentiĝo povas bloki la DNA-Purigan Kolumnon, kiu ankaŭ povas influi RNA-rendimenton kaj kvaliton.Ni rekomendas, ke kiam vi faras specimenan fragmentiĝon, rapide muelu en sufiĉaj kvantoj da likva nitrogeno por rompi la histojn kiel ĉelaj muroj kaj ĉelaj membranoj de la specimenoj kiel eble plej multe.Por plantaj specimenoj de polifenolaj polisakaridoj, ni rekomendas, ke vi uzu Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
2.Aspiru la DNA-Puriga Kolumno izolita supernatante, aspiru la ebla ĉela derompaĵo buleto.
Aspirita ĉela derompaĵo buleto povas ŝtopi la RNA-nur-Kolumnon dum RNA-adsorbadproceduroj (vidu paŝon 5 de proceduro, paŝon 6 de la polisakarida polifenolproceduro).Ni rekomendas, ke oni zorgu kiam oni aspiras ĉi tiun supernatanton por eviti ke ĉelaj derompaĵoj estu aspiritaj.
3. La komenca kvanto de specimeno estas tro granda.
Troa specimenuzokutimo rezultigos nekompletan specimenan fragmentiĝon aŭ nekompletan lizon de ĉeloj de Buffer PRL1 aŭ Buffer PSL1, rezultigante ŝtopitan purigan kolonon por purigaj operacioj.Plant Total RNA Isolation Kit havas komencan maksimumon de 50 mg per ununura purigo de operaciita specimeno.Por plantprovaĵoj de polifenolaj polisakaridoj, ni rekomendas, ke vi provu la Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
4. La temperaturo de la centrifugilo estas tro malalta.
Tuta RNA-izolado kaj purigo krom likva nitrogena interrompo de specimena histo, ĉiuj paŝoj estas faritaj ĉe ĉambra temperaturo (20-25 °C).Kelkaj malalt-temperaturaj centrifugiloj havas temperaturojn sub 20 °C, kiuj povas kaŭzi blokadon en la DNA-Puriga Kolumno kaj/aŭ RNA-restriktita Kolumno.Se tio okazas, agordu la centrifugan temperaturon al 20-25 °C kaj antaŭvarmigu la lizmiksaĵon kaj/aŭ la aldonon de etanola apartiga supernatante al 37 °C.
Neniu RNA ĉerpita aŭ RNA-rendimento estas malalta
Estas kutime multaj faktoroj kiuj influas la reakivan efikecon, kiel ekzemple: specimena RNA-enhavo, operaciometodo, la eluovolumeno, ktp.
Analizo de oftaj kaŭzoj kiel sube:
1.Glacia bano aŭ malalta temperaturo (4 °C) centrifugado estis farita dum la operacio.
Sugesto: Funkcii ĉe ĉambra temperaturo (15-25 °C) en la tuta procezo, ne faru glacibanon kaj malaltan temperaturon centrifugadon.
2.La RNA estis degradita pro nedeca konservado de la provaĵo aŭ longperspektiva konservado de la provaĵo.
Rekomendo: La ĵus kolektitaj specimenoj devas esti rapide frostigitaj en likva nitrogeno, kaj poste konservitaj ĉe -80 °C dum longa tempo, evitu ripetan frostigon kaj degelon de specimenoj;aŭ tuj trempu la specimenojn en RNA-stabiligilo RNAlater solvo (bestaj specimenoj).
3.Nesufiĉa specimena fragmentiĝo kaj lizo kondukas al blokado de la puriga kolono.
Sugesto: Muelante la histon, bonvolu certigi, ke la histo estas sufiĉe muelita, kaj rapide transdoni ĝin al la antaŭpreparita Buffer PSL1 (konfirmu, ke la ĝusta proporcio de β-ME estis aldonita, vidu la paŝon 1 de la proceduro).
4.La eluvaĵo estis aldonita malĝuste.
Sugesto: Certigu, ke RNase-Free ddH2O estas gutita en la mezon de la puriga kolonmembrano.
5.La ĝusta volumo de absoluta etanolo ne estis aldonita al Buffer PSL2 aŭ Buffer PRW2.
Sugesto: Bonvolu sekvi la instrukciojn, aldoni la ĝustan volumon de absoluta etanolo al Buffer PSL2 kaj Buffer PRW2 kaj miksi bone antaŭ ol la ilaro estas uzata.
6.La kvanto de histoprovaĵo estas netaŭga.
Sugesto: Uzu 50 mg da histo per 500 μl da Buffer PSL1.Uzi tro da histo reduktos la kvanton de RNA eltirita kaj la pureco de la rezulta RNA ankaŭ estos reduktita.Ni forte rekomendas, ke la komenca specimena dozo ne superu 50 mg per operacio de eltiro de RNA.
7. Nekonvena eluovolumo aŭ nekompleta elucio.
Sugesto: La eluiva volumo de la puriga kolumno estas 50-200 μl;se la elucia efiko ne estas kontentiga, oni rekomendas plilongigi la tempon ĉe ĉambra temperaturo post aldoni antaŭvarmigitan RNase-Free ddH.2O, kiel 5-10 min.
8.La puriga kolumno havas etanolan restaĵon post lavado kun Buffer PRW2.
Sugesto: Se la malplena tubo estas centrifugata dum 1 minuto kaj ankoraŭ restas etanolo post lavado en Buffer PRW2, vi povas pliigi la tempon de la malplena tubo centrifugado al 2 minutoj, aŭ meti la purigan kolumnon ĉe ĉambra temperaturo dum 5 minutoj por plene forigi la restan etanolon.
9.La ilaro estis uzata malĝuste.
Sugesto: Por plantprovaĵoj de polifenolaj polisakaridoj, uzante oftajn ilarojn kiel Plant Total RNA Isolation Kit eble ne povas akiri idealajn RNA-provaĵojn.Ni rekomendas al vi uzi Plant Total RNA IsolationKit Plus, kiu estas speciale desegnita por polifenolaj polisakaridaj plantprovaĵoj.Ilaro speciale evoluigita por ĉerpi RNA de polifenolo kaj polisakaridaj plantprovaĵoj.
OD260/OD280-valoro estas malalta
RNA-eluo kun ddH2O kaj uzata por spektrofotometraj valoroj rezultigas malaltajn OD260/OD280-valorojn.Ni rekomendas uzi 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (prefere ol RNase-Free ddH2O por eligi RNA) por akiri relative ĝustajn OD260/OD280-valorojn, vidu "RNA-Koncentriĝo kaj Purigado-Analizoj" sur paĝo 19.
La purigita RNA estas degradita
La kvalito de purigita RNA estas rilatita al faktoroj kiel ekzemple specimenkonservado, RNase-poluado, kaj manipulado.
Analizo de oftaj kaŭzoj:
1.Tissue specimenoj ne estis stokitaj en tempo post kolekto.
Rekomendo: Se la histoprovaĵoj ne estas uzataj ĝustatempe post kolekto, bonvolu stoki ilin en likva nitrogeno je malalta temperaturo tuj aŭ transdoni ilin al -80 °C por longdaŭra konservado post rapida frosto en likva nitrogeno, aŭ tuj mergi la specimenojn en RNA-stabiligilo RNAlater solvo (bestaj specimenoj).Por RNA-eltiro, provu uzi ĵus kolektitajn histajn specimenojn.
2.Ripeta frostado kaj degelo de histoprovaĵoj.
Sugesto: Dum stokado de histoprovaĵoj, estas plej bone tranĉi ilin en malgrandajn pecojn por konservado, kaj elpreni parton de ili kiam ili uzas ilin por eviti la degeneron de RNA kaŭzita de ripeta frosto kaj degelo de la specimenoj.
3.RNase estas enkondukita en la operacioĉambro aŭ ne portataj foruzeblaj gantoj, maskoj, ktp.
Sugesto: RNA-eltiradaj eksperimentoj estas plej bone faritaj en apartaj RNA-operacioj, kaj la laboratoriotablo devas esti purigita antaŭ la eksperimento, kaj foruzeblaj gantoj kaj maskoj devus esti portitaj dum la eksperimento por eviti RNA-degeneron kaŭzitan de la enkonduko de RNazo laŭ la plej granda mezuro.
4.La reakciilo estas poluita de RNase dum uzo.
Sugesto: Anstataŭigi per nova serio de plant-totala RNA-ekstrakta ilaro por rilataj eksperimentoj.
5.La centrifugilaj tuboj kaj pipetaj pintoj uzataj por RNA-manipulado estas poluitaj per RNase.
Sugesto: Certigu, ke la centrifugilaj tuboj, pipetpintoj, pipetoj ktp uzataj en RNA-eltiro estas ĉiuj RNase-Libre.
Instrukciaj Manlibroj:
