Kio estas mRNA-vakcino
La mRNA-vakcino transdonas RNA al la ĉeloj de la korpo por esprimi kaj produkti proteinantigenojn post koncernaj modifoj en vitro, tiel igante la korpon produkti imunreagon kontraŭ la antigeno, tiel vastigante la imunan kapaciton de la korpo.[1,3].
Figuro 1: Skema diagramo de la efiko de rekta injekto de mRNA-vakcino [2]
Klasifiko de mRNA-vakcinoj
mRNA-vakcinoj estas dividitaj en du tipojn:nereproduktantamRNA kajmem-amplifiĝantamRNA: mem-amplifiga mRNA ne nur ĉifras la celantigenon, sed ankaŭ ĉifras la reproduktadon kiu ebligas intraĉelan RNA-plifortigon kaj proteinesprimmekanismon.Ne-reproduktantaj mRNA-vakcinoj nur ĉifras celantigenojn kaj enhavas 5' kaj 3' netradukitajn regionojn (UTR).Ili provizas ampleksan stimulon de adaptiĝo kaj denaska imuneco, nome surloke antigen-esprimo kaj danĝersignaltranssendo, kaj havas la jenajn aplikojn Trajtoj[2,3]
●Povas provizi ampleksan stimulon de adaptebleco kaj denaska imuneco, nome surloka esprimo de antigenoj kaj transdono de danĝersignaloj.
●Povas stimuli "ekvilibran" imunreagon, inkluzive de humuraj kaj ĉelaj efikoj kaj imuna memoro
●Povas kombini malsamajn antigenojn sen pliigi la kompleksecon de vakcina formuliĝo
●Daŭra plibonigo de imuna potencialo povas esti atingita per ripeta vakcinado, kaj ekzistas neniu aŭ malmulte da imuna respondo al la portanto.
●Varmstabila mRNA-vakcinoj povas simpligi la transportadon kaj stokadon de vakcinoj
Figuro 2: Skema diagramo de mRNA-vakcino kaj ĝia antigen-esprimmekanismo [4]
Trajtoj de mRNA-vakcinoj
Kompare kun tradiciaj vakcinoj, mRNA-vakcinoj havas simplajn produktadprocezojn, rapidajn evolurapidecojn, neniun bezonon de ĉelkulturo, kaj malaltan koston.Kompare kun DNA-vakcinoj, mRNA-vakcinoj ne bezonas eniri la nukleon kaj ekzistas neniu risko de integriĝo en la gastigan genaron.La duoniĝotempo povas esti ĝustigita per modifo.
Tablo 1: Avantaĝoj kaj malavantaĝoj de mRNA-vakcinoj
|
| Avantaĝo | Manko |
| mRNA-vakcino | Rapida esplorado kaj disvolviĝo, produktado de vakcino nur daŭras 40 tagojn | Ekfunkciigu nenecesan imunreagon
|
| mRNA-malstabileco sub fiziologiaj kondiĉoj, facile degradi | Ne integriĝos en la genaron por eviti eblajn terapiajn mutaciojn
| |
| Ne necesas ajna nuklea lokaliza signalo, transskribo | La efikeco de la sekureca nuklea restas kontrolinda
|
Figuro 3: Fluodiagramo de produktado kaj preparado de mRNA-vakcino [4]
Foregene Viral RNA-Izola ilaro
RT-qPCR Facila (Unu Paŝo)
Plibonigitaj strategioj por la preparado de mRNA-vakcinoj
Pro la malbona stabileco de mRNA mem, facila degenero de nucleazoj en histoj, malalta ĉela enirefikeco, kaj malalta tradukefikeco, tiuj difektoj limigas la aplikon de mRNA-vakcinoj.Traduka efikeco ankaŭ ludas tre kritikan rolon.Liverveturiloj povas esti dividitaj en virusvektorojn kaj ne-virusajn vektorojn (inkluzive de lipozomoj, ne-lipozomoj, virusoj, nanopartikloj, ktp.).Tial necesas rilataj plibonigaj rimedoj.La sekvanta estas farmakologia plibonigstrategio por mRNA-preparo[2]
1 Sintezu ĉap-analogaĵojn aŭ uzu ĉapajn enzimojn por stabiligi mRNA kaj pliigi proteintradukadon per ligado al eŭkariota traduka inicfaktoro 4E (EIF4E)
2 Alĝustigu la elementojn en la 5′-netradukita regiono (UTR) kaj 3′-UTR por stabiligi mRNA kaj pliigi proteinan tradukadon
3 Aldonado de Poly(A) vosto povas stabiligi mRNA kaj pliigi proteinan tradukadon
4 Modifi nukleozidojn por redukti denaskan imunaktivigon kaj pliigi tradukon
5 Traktado kun RNase III kaj rapida proteina likva kromatografio (FPLC) purigo povas redukti imunan aktivigon kaj pliigi tradukadon.
6 Optimumigu sekvencojn aŭ kodonojn por pliigi tradukon
7 Kunlivero de tradukaj inicfaktoroj kaj aliaj metodoj por ŝanĝi tradukadon kaj imunogenecon
Figuro 4: In vitro-transskribo (IVT) mRNA-produktado kaj kunigprocezo [5]
Grandskala preparado de plasmida DNA
Plasmida DNA-purigo plejparte forigas poluaĵojn kiel ekzemple RNA, malferma cirkla DNA-endotoksino, gastiga proteino kaj gastiga nukleacido, kaj kutime transformas rekombinan plasmidon en E. coli.E. coli spertas alt-densecan fermentadon, tiam solid-likvan apartigon, kaj kolekton de E. coli.La E. coli tiam estas submetita al alkala lizo, centrifuga solid-likva apartigo kaj mikrofiltrada klarigo post lizo, ultrafiltrado kaj koncentriĝo post klarigo, kaj tiam kromatografia purigo.
Purigado de plasmida DNA:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N , Hogan MJ , Porter FW , et al.mRNA-vakcinoj - nova epoko en vakcinologio [J].Nature Reviews Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Enkonduko al RNA-Vakcinoj.En: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA-Vakcinoj.Metodoj en Molekula Biologio, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G , Zhang C , Li J , et al.mRNA kiel Transforma Teknologio por Vakcina Disvolviĝo por Kontroli Infektajn Malsanojn [J].Molekula Terapio, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Denaska/Adaptive Imune Response,Trends in Molecular Medicine,Volume 26, Issue 3,2020,Pages 311-323.
Afiŝtempo: Aŭg-05-2021
