Varm-komenca Taq-enzimo estas vaste uzata.Kompare kun ordinara DNA-polimerazo, varmega Taq-enzimo povas efike eviti iun nespecifan plifortigon kaj la formadon de primer-dimeroj, kaj povas efike plibonigi la sukcesprocenton de cela gena plifortigo.Precipe en la kampo de genetika testado, varmega Taq-enzimo estis identigita kiel deviga normo en la industrio, kaj ordinara DNA-polimerazo ne devus esti uzata.Kiel videblas de ĉi-supra, varmegaj Taq-enzimoj estas vaste uzataj.Nuntempe, ekzistas multaj markoj de varmegaj Taq-enzimoj sur la enlanda merkato, sed ne ekzistas multaj varmegaj Taq-enzimoj kun alta kvalito.Fronte al tiom da varmegaj Taq-enzimaj produktoj, kiel ni elektu?

1. Elektu la varm-komencan Taq-enzimon kun alta plifortiga efikeco

PCR plifortiga efikeco estas proksime rilatita al la efikeco de Taq-enzimo.Post kiam bona Taq-enzima reakcia sistemo estas optimumigita, la plifortiga efikeco estas super 95%, kaj la plifortiga gamo de la komenca ŝablonkvanto estas larĝa.Kontentiga plifortigo povas esti akirita kiam la cela gena enhavo estas malalta, kaj ne estas facile veneniĝi kiam la ŝablonkvanto estas alta, kaj la eksponenta plifortiga periodo estas longa.Por la enzimo Taq kun malbona rendimento, eĉ se la reagsistemo estis multfoje optimumigita, la plifortiga efikeco ankoraŭ estas malpli ol 90%, la "S" formo de la plifortiga kurbo ne estas evidenta, la deklivo estas malgranda kaj la kurbo estas plata.Kiam la kvanto de ŝablono estas malalta, ĝi ne povas esti plifortigita, kaj kiam la kvanto de ŝablono estas alta, la plifortiga efiko ne estas ideala.Tial, la elekto de DNA-polimerazoj kun alta plifortiga efikeco estas decida al la sukceso de PCR kaj qPCR.

2. Elektu varm-komencan Taq-enzimon kun forta enzima potenco

La enzimeca potenco de la Taq-enzimo rilatas al la plifortiga efikeco.Ĝenerale, ju pli forta estas la enzimeca potenco de la varm-komenca Taq-enzimo, des pli longa estas la eksponenta kreskoperiodo de PCR-plifortigo, des pli tipa "S-forma" kurbo, des pli alta la fluoreskeca signalvaloro, kaj des pli taŭga por multipleksa PCR-detekto.Markaj DNA-polimerazoj kun malforta enzimeca potenco povas ĝenerale nur subteni 2-pleksajn reagojn.Farante 3-pleksajn reagojn, la plifortiga kurbo estas malalta, la fluoreskeca signalvaloro estas malalta, kaj ne ekzistas tipa plifortiga kurbo, do la rezultoj estas malfacile juĝi.

3. Elektu varm-komencan Taq-enzimon kun alta sentemo

Ĝenerale parolante, DNA-polimerazo havas altan plifortigan efikecon kaj altan sentemon, sed ekzistas ankaŭ nekongruoj.Se la celgena abundo de la provaĵo por esti plifortigita estas malalta, estas rekomendite testi la plifortigan sentemon de Taq-enzimo.La plej ofta detektometodo estas efektivigi 10-oblan aŭ 5-oblan gradientdiluon de la celgena plasmidfragmento, efektivigi PCR-detekton ĉe la pli malalta diluo, kaj elekti la varm-komencan Taq-enzimon kun pli alta detekta sentemo.

Oni povas vidi el ĉi-supraj, ke esploristoj devas elekti laŭ siaj propraj eksperimentaj postuloj kaj financaj kondiĉoj.Plej bone estas fari gradientdiluan plifortigan eksperimenton por detekti la plifortigan efikecon kaj sentemon de la varmega Taq-enzimo.

Ekzemplo de Foregene's Taq DNA-polimerazo:

Foreasy HS Taq DNA Polymerase

Priskribo

Foreasy HS Taq DNA Polymerase estas DNA-polimerazo esprimita en Escherichia coli inĝenieristikbakterioj per gena rekombinigteknologio.La enzimo estas kombinita kun unika reakcia bufro, kiu igas la produkton tre imuna kaj kongrua, kaj povas rekte uzi la specimenan lizaton (Foregene Lysis-sistemo) kiel ŝablonon por detektaj reagoj.

Apliko

Kvalita PCR kaj kvanta PCR-detekto de purigitaj ŝablonoj kaj ne-purigitaj ŝablonoj.

Kontrolo de kvalito

1.Ne estas detektita eksogena nuclease-agado

2.PCR-metodo por detekti restan genoman DNA sen gastiganto

3.Ĝi povas efike plifortigi unu-kopiajn genojn en la homa Genaro

4. Konservu ĉe ĉambra temperaturo dum semajno, neniu evidenta aktiveco ŝanĝiĝas

Produktaj detaloj: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/