Viral DNA&RNA-Izola Ilaro Viral DNA kaj RNA-Eltiro-Puriga Preparado
Specifoj
50 Preparoj, 200 Preparoj
Viral RNA Nuklea acido Purigado Eltira Izola Ilaro uzas la spinkolumnon kaj formulon evoluigitan de Foregene, kiu povas efike ĉerpi altpuran kaj altkvalitan virusan RNA el specimenoj kiel ekzemple plasmo, serumo, senĉela korpa fluido kaj ĉelkultura supernatante.La ilaro specife aldonas Linear Acrylamide, kiu povas facile kapti malgrandajn kvantojn de RNA de la specimenoj.RNA-Nur-Kolumno povas efike ligi RNA.La ilaro povas procesi grandan nombron da specimenoj samtempe.
La tuta ilaro ne enhavas RNazon, do la purigita RNA ne estos degradita.Buffer viRW1 kaj Buffer viRW2 povas certigi ke la akirita viral nuklea acido libera de proteino, nuclease aŭ aliaj malpuraĵoj, kiu povas esti uzata rekte por kontraŭflue molekula biologio eksperimentoj.
Kit-komponantoj
| Lineara Akrilamido |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| RNazo-Libera ddH2O |
| Kolumno DNA/RNA |
| Instrukcioj |
Trajtoj & avantaĝoj
■ Funkciado ĉe ĉambra temperaturo (15-25℃) dum la tuta procezo, sen glacia bano kaj malalta temperaturo centrifugado.
■ Kompleta ilaro RNase-Free, ne necesas zorgi pri RNA-degradado.
■ Alta rendimento de nuklea acido: DNA/RNA-nur Kolumno kaj unika formulo povas efike purigi DNA kaj RNA.
■ Granda specimena pretiga kapablo: ĝis 200μl-specimenoj povas esti procesitaj ĉiufoje.
■ Rapida rapido: facile operaciebla kaj kompletigebla ene de 20 minutoj.
■ Sekureco: ne necesas organika reakciilo.
■ Alta kvalito: La purigitaj RNA-fragmentoj estas de alta pureco, liberaj de proteino kaj aliaj malpuraĵoj, kaj povas renkonti diversajn kontraŭfluajn eksperimentajn aplikojn.
Kit-aplikaĵo
Ĝi taŭgas por eltiro kaj purigado de virusa nuklea acido en specimenoj kiel plasmo, serumo, senĉela korpo fluido kaj ĉelkultura supernatante.
Laborfluo
Diagramo
Stokado kaj Konsumodaŭro
■ Ĉi tiu ilaro povas esti konservita dum 24 monatoj sub sekaj kondiĉoj ĉe ĉambra temperaturo (15-25℃);se ĝi devas esti konservita por pli longa tempo, ĝi povas esti stokita en 2–8℃.
■ Lineara Akrilamida solvo povas esti stokita ĉe ĉambra temperaturo dum 7 tagoj;post ricevi la ilaron, bonvolu elpreni ĝin kaj konservi ĝin je -20°C.
■ Post aldoni Linear Acrylamide al Buffer DRL, ĝi povas esti stokita je 2-8 °C ĝis 48h.Bonvolu uzi la pretan solvon.
Gvidilo pri Problema Analizo
La sekvanta estas analizo de la problemoj kiuj povas esti renkontitaj en la eltiro de virusa DNA/RNA, esperante esti helpema al viaj eksperimentoj.Krome, por aliaj eksperimentaj aŭ teknikaj problemoj krom operaciaj instrukcioj kaj analizado de problemoj, ni dediĉis teknikan subtenon por helpi vin.Se vi havas ajnajn bezonojn, bonvolu kontakti nin: 028-83360257 aŭ Retpoŝto:
Tech@foregene.com.
Neniu nukleacida eltiro aŭ malalta nukleacida rendimento
Estas kutime multaj faktoroj kiuj influas la reakivan efikecon, kiel ekzemple: specimena enhavo de nuklea acido, operacia metodo, eluovolumeno, ktp.
Analizo de oftaj kaŭzoj:
1. Glacia bano aŭ malalta temperaturo (4 °C) centrifugado estis farita dum la proceduro.
Sugesto: Funkcii ĉe ĉambra temperaturo (15-25 °C) dum la tuta procezo, ne glacibanon kaj malalttemperaturan centrifugon.
2. La specimeno estis konservita nedece aŭ la specimeno estis konservita tro longe.
Rekomendo: Konservu specimenojn ĉe -80 °C kaj evitu ripetan frostiĝon kaj degelon;provu uzi ĵus kolektitajn specimenojn por eltiro de nuklea acido.
3. Nesufiĉa specimena lizo.
Rekomendo: Bonvolu certigi, ke la specimeno kaj liza laborsolvo estas plene miksitaj kaj kovataj ĉe ĉambra temperaturo (15-25 °C) dum 10 minutoj.
4. Malĝusta aldono de eluento.
Sugesto: Certigu, ke RNase-Free ddH2O estas aldonita gute al la mezo de la puriga kolumna membrano, kaj ne faligu ĝin sur la purigan kolumnan ringon.
5. La ĝusta volumo de absoluta etanolo ne estis aldonita al Buffer RW2.
Sugesto: Bonvolu sekvi la instrukciojn, aldoni la ĝustan volumon de absoluta etanolo al Buffer RW2 kaj miksi bone antaŭ ol uzi la ilaron.
6. Nekonvena specimena volumo.
Sugesto: 200µl da specimeno estas prilaboritaj por ĉiu 500µl da Buffer DRL.Troa provaĵprilaborado rezultigos pli malaltan nukleacidan ekstraktan rendimenton.
7. Nekonvena eluovolumo aŭ nekompleta elucio.
Rekomendo: La eluanta volumo de la puriga kolumno estas 30-50μl;se la elucia efiko ne estas kontentiga, oni rekomendas plilongigi la tempon ĉe ĉambra temperaturo post aldoni antaŭvarmigitan RNase-Free ddH2O, kiel 5-10min.
8. Etanolo restas sur la kolono post lavado kun Buffer RW2.
Sugesto: Se etanolo restas post centrifugado kun Buffer RW2 dum 2 minutoj, la kolono povas esti metita ĉe ĉambra temperaturo dum 5 minutoj post centrifugado por plene forigi restan etanolon.
La purigita nuklea acido estas degradita
La kvalito de la purigita nuklea acido rilatas al la konservado de la specimeno, RNase-poluado, operacio kaj aliaj faktoroj.Analizo de oftaj kaŭzoj:
1. La kolektitaj specimenoj ne estis konservitaj ĝustatempe.
Sugesto: Se la specimeno ne estas uzata ĝustatempe post kolekto, bonvolu konservi ĝin je -80 °C je malalta temperaturo tuj.Por RNA-eltiro, provu uzi ĵus kolektitajn specimenojn.
2. Kolektu specimenojn kaj frostigu kaj degelu plurfoje.
Sugesto: Evitu frostigon kaj degelon (ne pli ol unufoje) dum la kolekto kaj konservado de specimenoj, alie la nukleacida rendimento estos reduktita.
3. RNase estas enkondukita en la operacioĉambro aŭ forĵeteblaj gantoj, maskoj ktp ne estas portitaj.
Rekomendo: RNA-eltiradaj eksperimentoj estas plej bone faritaj en aparta RNA-operacioĉambro, kaj la laboratoriotablo devas esti purigita antaŭ la eksperimento.
Portu foruzeblajn gantojn kaj maskojn dum la eksperimento por eviti RNA-degeneron kaŭzitan de la enkonduko de RNase pleje.
4. La reakciilo estis poluita per RNase dum uzo.
Rekomendo: Anstataŭigi per nova Viral DNA/RNA-Izola Ilaro por rilataj eksperimentoj.
5. La centrifugiltuboj kaj pipetpintoj uzataj por RNA-manipulado estas poluitaj per RNase.
Sugesto: Certigu, ke la centrifugilaj tuboj, pipetpintoj, pipetoj ktp uzataj por RNA-eltiro estas ĉiuj RNase-Liberaj.
Purigita nuklea acido influas kontraŭfluajn eksperimentojn
DNA kaj RNA purigita de la puriga kolumno, se la sala jono kaj proteina enhavo estas tro alta, ĝi influos la kontraŭfluajn eksperimentojn, kiel: PCR-ampligo, inversa transskribo ktp.
1. La eluitaj DNA kaj RNA havas restajn saljonojn.
Sugesto: Certigu, ke la ĝusta volumo de absoluta etanolo estas aldonita al Buffer RW2, kaj lavu la purigan kolumnon dufoje kun la centrifuga rapido specifita en la operaciaj instrukcioj;Faru centrifugadon por minimumigi saljon-poluadon.
2. La eluitaj DNA kaj RNA havas etanolaj restaĵoj.
Sugesto: Post konfirmi la lavadon per Buffer RW2, faru malplenan tuban centrifugon kun la centrifuga rapido en la operaciaj instrukcioj;se ankoraŭ estas etanola restaĵo, vi povas centrifugi la malplenan tubon kaj poste meti ĝin ĉe ĉambra temperaturo dum 5 minutoj por forigi la etanolan restaĵon en la plej granda mezuro.
Instrukciaj Manlibroj:
Viral DNA&RNA-Izola Instrukcia Manlibro
