1: Anstataŭigu la eksperimentajn provizojn ĝustatempe

Agordu (NTC) negativan kontrolon kaj ripetu ĝin multfoje.Post kiam oni trovas, ke estas PCR-produkta poluado en la laboratorio, anstataŭigu ĉiujn eksperimentajn provizojn ĝustatempe.Kiel ekzemple: re-diluu kaj preparu la enkondukojn, re-steriligu la pipetpinton, EP-tubon, ddH2O, ktp., anstataŭigi per nova pipeto, kaj provizore prunti aliajn laboratoriojn por fari PCR-eksperimentojn.La poluita laboratorio devas esti ventolita kaj surradiita per ultraviolaj radioj ĝis la PCR-produkta poluado estas forigita antaŭ ol daŭrigi la eksperimenton.

2: Plilongigi UV-ekspontempon

Indas noti, ke por forigi DNA-poluadon, regula transviola radiado devas esti plilongigita je 2 horoj ol kutime.Eĉ tiel, la efiko de UV-surradiado pri forigo de malgrandaj fragmentoj (sub 200bp) de DNA-poluado ankoraŭ ne estas bona.

Ultraviola ondolongo (nm) estas ĝenerale 254/300nm, kaj sufiĉas surradii dum 30 minutoj.Oni devas rimarki, ke elektante UV por forigi la poluadon de restaj PCR-produktoj, la longo de la PCR-produkto kaj la distribuado de bazoj en la produkta sekvenco devus esti konsiderataj.UV-surradiado estas nur efika por longaj fragmentoj super 500 bp, kaj havas nur malmulte da efiko al mallongaj fragmentoj.

Dum UV-surradiado, la pirimidinbazoj en la PCR-produkto formos dimerojn.Tiuj dimeroj povas fini la etendaĵon, sed ne ĉiuj pirimidinoj en la DNA-ĉeno povas formi dimerojn, kaj UV-surradiado ankaŭ povas rompi la dimerojn..La grado da dimerformacio dependas de la UV-ondolongo, la speco de pirimidindimero kaj la sekvenco de nukleotidoj najbaraj al la dimerejo.Tial, se la PCR plifortigitaj fragmentoj estas malgrandaj, oni rekomendas uzi la UNG kontraŭ-PCR-produktan poluadon.

3：Ofte uzataj DNA-poluokaŝkaptistoj

Aerosoloj estas facile generitaj kiam pipetoj estas aldonitaj, kio estas malfacile eviti, kaj ĝi ekloĝos rapide.Sekve, estas sendube bona elekto ofte uzi specialajn DNA-poluajn kadavrojn por malhelpi la disvastiĝon de DNA-poluado.

4: Uzu UNG-kontraŭpoluan sistemon

Post kiam la PCR-produkta poluado estas forigita, la testa laboratorio povas uzi la UNG kontraŭ-PCR-produktan poluadon por malhelpi PCR-produktan poluadon.En ĝeneralaj laboratorioj, vi povas fari simplajn eksperimentajn sekciojn, strikte apartigi la PCR-produktan areon de aliaj areoj, establi certajn laboratoriajn regulojn kaj regularojn kaj fari koncernan trejnadon por malhelpi la okazon de PCR-produkta poluado.

Rekomendoj: Establi akcepteblan PCR-laboratorion, konservi bonan PCR-medion, formuli normajn PCR-operaciajn procedurojn kaj kultivi la rigoran funkcian konscion de eksperimentantoj estas la ŝlosiloj por malhelpi aŭ redukti la poluadon de PCR-eksperimentoj.