• facebook
  • linkedin
  • youtube

Enkonduko:

RNA , scienca nomo ribonukleika acido , ĝia mallongigo devenas de RiboNucleic Acid , estas speco de nuklea acido formita per ligado de almenaŭ dekoj da ribonukleotidoj per fosfodiestera ligoj .

La kondiĉo de esplorado de RNA estas eltiri senpoluan Totalan RNA, kaj la baza principo de RNA-ekstraktado povas esti proksimume resumita jene:

1. Disrompu la ĉelojn unue

2. Poste forigu makromolekulajn malpuraĵojn (proteinoj, lipidoj, DNA, ktp.)

3. Fine, la RNA estas precipita dum oni forigas salojn kaj organikajn solvilojn, kaj plue purigas la RNA.

Pasinteco kaj nuntempo de eltira metodo

La unua generacio de RNA eltiro metodo estas la TRIzol precipita metodo (reakciiloj uzitaj inkluzivas guanidino isotiocianato, fenolo, kloroformo, ktp.) inventita fare de avo nomita Piotr Chomczynski kaj avino Nicoletta Sacchi, ĉar tiu invento permesas RNA eltiro Rapida kaj facila, ekde tiam komenciĝis la pliiĝo de RNA-esplorado.

fjghj

Poste, Grandpa vendis ĉi tiun patenton al Invitrogen, kaj Invitrogen reklamis ĉi tiun metodon al la mondo kaj iĝis vaste uzata metodo.

Poste, Invitrogen estis akirita fare de Thermo!

Reprezenta produkto: TRIzol-reakciilo de Invitrogen

cjgh

Tamen, la metodo de precipitaĵo de TRIzol postulas multoblan precipitadon kaj eltiron de RNA, kaj la reakciiloj uzitaj estas toksaj kaj daŭras longan tempon por funkcii.

Tial, la duageneracia kolumna-enzima purigmetodo ekestis, uzante silikaĝelan membranon kiel specifan nukleacidan adsorbadmaterialon por maksimumigi la reakiron de RNA en la provaĵo forigante aliajn malpuraĵojn.

La duageneracia metodo simpligas la operacion surbaze de stabila agado, reduktas la riskan faktoron kaj plibonigas la efikecon de RNA-eltiro.

Reprezentaj produktoj: QIAGEN RNeasy kaj plej hejmaj produktoj

ghjfgh

Tamen, kaj la unua kaj dua generaciometodoj postulas la uzon de DNase forigi DNA-poluadon, kiu alportas iun ĝenon al postaj kontraŭfluaj eksperimentoj.Resta DNase reduktos la efikecon de inversa transskribo kaj reduktos la unua-fadenan cDNA-sintezon, tiel influante la precizecon de la rezultoj.

Tial, la triageneracia ekstrakta metodo estas optimumigita surbaze de la dua generacio.La eksperimento ne bezonas aldoni iujn ajn enzimojn, kaj RNA povas esti facile akirita kun nur du kolumnoj.

Kolumno 1: DNA-Puriga Kolumno por purigi DNA

Kolumno 2: RNA-nur Kolumno specife adsorbas kaj reakiras RNA

Tia simpla operacio ne nur ŝparas tempon, sed ankaŭ faciligas la funkciadon de kontraŭfluaj eksperimentoj!

Reprezentaj produktoj: QIAGEN RNeasy Plus kajAntaŭgenoRNA-purigaj serioproduktoj

cgjfgj

(RNeasy Plus)

vghjgh

Tiu de ForegenePlant Totala RNA-Izola Ilaro)

Diru al vi trankvile!La RNA-kompleto de Foregene ankaŭ prezentas super facile uzeblan RNase Eraser, kiu povas tute forigi 400μg da RNase sur la solida surfaco en 1 minuto, sen aldoni ajnajn toksajn substancojn al la homa korpo!

Pic1: Funkcia procezo kompara diagramo

cjcghj

La produktoj de Foregene povas kompletigi RNA-eltiron en nur du kantoj, ne ĵaluzigu aliajn pri via eksperimenta progreso!

Pic2:EEksperimentaj rezultoj kompara diagramo

La unua generacio (1: TRIzol)

La dua generacio (2: RNeasy de QIAGEN)

La tria generacio (3: RNeasy plus de QIAGEN, 4: Foregene)

ghjghk

Pic3: qPCR-grafiko (plifortiga kurba grafeo)

La unua generacio (verda signifas TRIzol -, ruĝa signifas TRIzol +)

jhkgjhfg

La dua generacio (ĉielbluo signifas QIAGEN RNeasy-, ruĝa signifas QIAGEN RNeasy +)

cjh1

La tria generacio (blua signifas QIAGEN RNeasy plus, verda signifas Foregene)

fgjgy2

(Noto: qPCR-grafo "-" indikas ke DNase ne estis aldonita kaj DNA-poluado ne estis forigita. Tial, la CT estas pli alta kaj la rezulto ne estas preciza; "+" indikas ke DNase estis aldonita kaj la DNA-poluado estis forigita, la rezulto estas preciza)

Ĉiu teknika ĝisdatigo signifas, ke la funkciado de la eksperimento disvolviĝas en pli simpla kaj pli amika direkto.

Foregene celas helpi al pli da sciencaj esploristoj ŝpari eksperimentajn tempon kaj koston, akiri altkvalitajn eksperimentajn rezultojn kaj kune krei pli valorajn sciencajn esplorajn atingojn.


Afiŝtempo: Jul-09-2021