Antikorpoj, ankaŭ nomitaj imunglobulinoj (Ig), estas glikoproteinoj kiuj specife ligas al antigenoj.
 
Konvencia antikorpa preparo estas produktita imunigante bestojn kaj kolektante antiserumon.Tial, antiserumo kutime enhavas antikorpojn kontraŭ aliaj senrilataj antigenoj kaj aliajn proteinkomponentojn en la serumo.Ĝeneralaj antigenmolekuloj plejparte enhavas multoblajn malsamajn epitopojn, tiel ke konvenciaj antikorpoj ankaŭ estas miksaĵo de antikorpoj kontraŭ multoblaj malsamaj epitopoj.Eĉ la konvenciaj serumantikorpoj direktitaj kontraŭ la sama epitopo daŭre estas kunmetitaj de heterogenaj antikorpoj produktitaj per malsamaj B-ĉelklonoj.Tial, konvenciaj serumantikorpoj ankaŭ estas nomitaj policlonaj antikorpoj, aŭ plurklonaj antikorpoj mallonge.
 
Monoklona antikorpo (monoklona antikorpo) estas tre unuforma antikorpo produktita de ununura B-ĉelklono kaj nur direktita kontraŭ specifa epitopo.Ĝi estas kutime preparita per hibridomteknologio - hibridoma antikorpteknologio estas bazita sur ĉelfuzioteknologio, kombinante B-ĉelojn kun la kapablo sekrecii specifajn antikorpojn kaj mielomĉelojn kun senfina kreskokapacito en B-ĉelhibridomojn.Tiu hibridomĉelo havas la karakterizaĵojn de gepatra ĉelo.Ĝi povas multiĝi senfine kaj senmorte en vitro kiel mielomaj ĉeloj, kaj ĝi povas sintezi kaj kaŝi specifajn antikorpojn kiel lienaj limfocitoj.Per klonado, unuklona linio derivita de ununura hibridomĉelo, tio estas, hibridoma ĉellinio, povas esti akirita.La antikorpoj kiujn ĝi produktas estas tre homogenaj antikorpoj kontraŭ la sama antigena determinanto, tio estas, unuklonaj antikorpoj.
 
Antikorpoj ekzistas kiel unu aŭ pluraj Y-formaj monomeroj (t.e., unuklonaj antikorpoj aŭ policlonaj antikorpoj).Ĉiu Y-forma monomero estas kunmetita de 4 polipeptidĉenoj, inkluzive de du identaj pezaj ĉenoj kaj du identaj malpezaj ĉenoj.Malpeza ĉeno kaj peza ĉeno estas nomitaj laŭ sia molekula pezo.La pinto de la Y-forma strukturo estas la varia regiono, kio estas la antigena ligloko.(Eltiraĵo de Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Antikorpa strukturo
Peza ĉeno
Ekzistas kvin specoj de mamulaj Ig pezaj ĉenoj, nomitaj kun la grekaj literoj α, δ, ε, γ, kaj μ.La ekvivalentaj antikorpoj estas nomitaj IgA, IgD, IgE, IgG, kaj IgM.Malsamaj pezaj ĉenoj malsamas laŭ grandeco kaj konsisto.α kaj γ enhavas proksimume 450 aminoacidojn, dum μ kaj ε enhavas proksimume 550 aminoacidojn.
Ĉiu peza ĉeno havas du regionojn: la konstanta regiono kaj la varia regiono.Ĉiuj antikorpoj de la sama tipo havas la saman konstantan regionon, sed ekzistas diferencoj inter antikorpoj de malsamaj tipoj.La konstantaj regionoj de la pezaj ĉenoj γ, α, kaj δ estas kunmetitaj de tri Ig-domajnoj en tandemo, kun ĉarnirregiono por pliigi ĝian flekseblecon;la konstantaj regionoj de la pezaj ĉenoj μ kaj ε estas kunmetitaj de 4 Ig-domajnoj.La varia regiono de la peza ĉeno de la antikorpo produktita de malsamaj B-ĉeloj estas malsama, sed la varia regiono de la antikorpo produktita de la sama B-ĉelo aŭ ĉelklono estas la sama, kaj la varia regiono de ĉiu peza ĉeno estas proksimume 110 aminoacidoj en longo., Kaj formi ununuran Ig-domajnon.
 
Malpeza ĉeno
Ekzistas nur du specoj de malpezaj ĉenoj en mamuloj: lambda tipo kaj kappa tipo.Ĉiu malpeza ĉeno havas du ligitajn domajnojn: konstanta regiono kaj varia regiono.La longo de la malpeza ĉeno estas ĉirkaŭ 211 ~ 217 aminoacidoj.La du malpezaj ĉenoj enhavitaj en ĉiu antikorpo estas ĉiam la samaj.Por mamuloj, la malpeza ĉeno en ĉiu antikorpo havas nur unu tipon: kappa aŭ lambda.Ĉe kelkaj malsuperaj vertebruloj, kiel ekzemple kartilagaj fiŝoj (kartilagaj fiŝoj) kaj ostaj fiŝoj, ankaŭ troviĝas aliaj specoj de malpezaj ĉenoj kiel la jota (joto) tipo.
 
Fab kaj Fc-segmentoj
La Fc-segmento povas esti rekte kombinita kun enzimoj aŭ fluoreskaj tinkturfarboj por etikedi antikorpojn.Ĝi estas la parto kie la antikorpo nitas sur la telero dum la ELISA-procezo, kaj ĝi ankaŭ estas la parto kie la dua antikorpo estas rekonita kaj ligita en imunprecipitado, imunblotting kaj imunohistokemio.Antikorpoj povas esti hidroligitaj en du F (ab) segmentojn kaj unu Fc-segmenton per proteolizaj enzimoj kiel ekzemple papaino, aŭ ili povas esti rompitaj de la ĉarnirregiono per pepsino kaj hidroligitaj en unu F (ab) 2-segmenton kaj unu Fc-segmenton.IgG-antikorpfragmentoj foje estas tre utilaj.Pro la manko de la Fc-segmento, la F (ab) segmento ne precipitos kun la antigeno, nek ĝi estos kaptita de imunĉeloj en en vivaj studoj.Pro la malgrandaj molekulaj fragmentoj kaj manko de krucliga funkcio (pro la manko de Fc-segmento), la Fab-segmento estas kutime uzita por radiomarkado en funkciaj studoj, kaj la Fc-segmento estas plejparte utiligita kiel blokanta agento en histokemia makulado.
 
Variaj kaj konstantaj regionoj
La varia regiono (V-regiono) situas ĉe 1/5 aŭ 1/4 (enhavante proksimume 118 aminoacidrestaĵojn) de la H-ĉeno proksime de la N-finaĵo kaj 1/2 (enhavante proksimume 108-111 aminoacidrestaĵojn) proksime de la N-finaĵo de la L-ĉeno.Ĉiu V-regiono havas peptidringon formitan per intra-ĉenaj disulfidaj ligoj, kaj ĉiu peptidringo enhavas ĉirkaŭ 67 ĝis 75 aminoacidrestaĵojn.La kunmetaĵo kaj aranĝo de aminoacidoj en la V-regiono determinas la antigenan ligan specifecon de la antikorpo.Pro la ĉiam ŝanĝiĝantaj specoj kaj sekvenco de aminoacidoj en la V-regiono, multaj specoj de antikorpoj kun malsamaj ligaj antigenspecifoj povas esti formitaj.La V-regionoj de la L-ĉeno kaj H-ĉeno estas nomitaj VL kaj VH, respektive.En VL kaj VH, la aminoacidkonsisto kaj sekvenco de kelkaj lokaj regionoj havas pli altan gradon da vario.Tiuj regionoj estas nomitaj hipervariablaj regionoj (HVR).La aminoacidkonsisto kaj aranĝo de la ne-HVR-partoj en la V-regiono estas relative konservativaj, kio estas nomita la kadra regiono.Ekzistas tri hipervariaj regionoj en VL, kutime situantaj ĉe aminoacidrestaĵoj 24 ĝis 34 kaj 89 ĝis 97 respektive.La tri HVRoj de VL kaj VH estas nomitaj HVR1, HVR2 kaj HVR3, respektive.La esplorado kaj analizo de ikso-radia kristala difrakto pruvis, ke la hipervaria regiono ja estas la loko, kie la antikorpa antigeno ligiĝas, do ĝi estas nomita la komplementec-determina regiono (CDR).La HVR1, HVR2 kaj HVR3 de VL kaj VH povas esti nomitaj CDR1, CDR2 kaj CDR3 respektive.Ĝenerale, CDR3 havas pli altan gradon da hipervariableco.La hipervaria regiono ankaŭ estas la ĉefloko kie la idiotipaj determinantoj de Ig-molekuloj ekzistas.Plejofte, la H-ĉeno ludas pli gravan rolon en ligado al la antigeno.
La konstanta regiono (C-regiono)situas ĉe 3/4 aŭ 4/5 (proksimume de aminoacido 119 ĝis la C-finaĵo) de la H-ĉeno proksime de la C-finaĵo kaj 1/2 (enhavas proksimume 105 aminoacidrestaĵoj) proksime de la C-finaĵo de la L-ĉeno.Ĉiu funkcia regiono de la H-ĉeno enhavas proksimume 110 aminoacidrestaĵojn, kaj enhavas peptidringon kunmetitan de 50-60 aminoacidrestaĵoj ligitaj per disulfidobligacioj.La aminoacidkonsisto kaj aranĝo de tiu regiono estas relative konstantaj en la sama besta Ig-izotipa L-ĉeno kaj la sama tipo H-ĉeno.Same, ĝi povas nur specife ligi al la responda antigeno, sed la strukturo de sia C-regiono estas la sama, tio estas, ĝi havas la saman antigenecon.La ĉevala kontraŭ-homa IgG sekundara antikorpo (aŭ kontraŭ-antikorpo) povas esti kombinita kun la du A kombinaĵo de antikorpoj (IgG) kontraŭ malsamaj ekzotoksinoj okazas.Ĉi tio estas grava bazo por prepari sekundarajn antikorpojn kaj apliki fluoreskeinon, izotopojn, enzimojn kaj aliajn etikeditajn antikorpojn.
 
 
Rilataj Produktoj:
Cell Direct RT-qPCR-ilaro